凝血-酶原時(shí)間（PT）檢測(cè)試劑盒（一期法）使用介紹

凝-血酶原時(shí)間（PT）是指在缺乏血小板的血漿中加入過(guò)量的組織凝血活酶和鈣離子，凝血-酶原轉(zhuǎn)化為凝血-酶，導(dǎo)致血漿凝固所需的時(shí)間。這個(gè)時(shí)間是反映血漿中凝血-因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ活性的指標(biāo)。

凝-血酶原時(shí)間(PT)檢測(cè)試劑盒(一期法)用于檢測(cè)人、動(dòng)物血液的血漿凝-血酶原時(shí)間的測(cè)定，不僅反映凝-血酶原水平，也反映因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纖維蛋白原在血漿中的水平，是外源性凝血系統(tǒng)的篩選實(shí)驗(yàn)試劑盒。

產(chǎn)品的組成：

試劑(A): 檸檬酸鈉抗凝劑(109mM)          20ml

試劑(B): PT 凝血活酶溶液                       15ml

自備材料：

1、枸櫞酸鈉抗凝劑采血管、采血針、止血帶、離心機(jī)、計(jì)時(shí)器或秒表、水浴鍋

操作步驟(僅供參考)：

1、制備待測(cè)血漿：取新鮮待測(cè)靜脈血 1.8ml，與 0.2ml 檸檬酸鈉抗凝劑(109mM)按9:1輕輕顛倒混勻。(或用含有 1/10 體積的檸檬酸鈉抗凝劑的塑料管或硅化玻璃管采血)

2、3000rpm（或 2500g）離心 10~15min，收集上層液(缺乏血小板的血漿)，轉(zhuǎn)移至塑料試管或離心管，以防止血小板被激活；同時(shí)應(yīng)設(shè)正常對(duì)照血漿。

3、取待測(cè)血漿 0.07ml 與 PT 凝血活酶溶液 0.14ml，分別置于 37℃水浴中，溫育3min。

4、將待測(cè)血漿(包括正常對(duì)照血漿)與 PT 凝血活酶溶液混合，立即開(kāi)動(dòng)秒表計(jì)時(shí)，不斷輕輕傾斜試管，記錄至液體停止流動(dòng)所需的時(shí)間。重復(fù) 2～3 次取平均值，即為凝血酶原時(shí)間(PT)。

凝血酶原時(shí)間比值(PTR)=待檢血漿的 PT/正常參比血漿的 PT

國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR)=PTRISI

參考區(qū)間：

PT 值：10～14s，待測(cè)者的測(cè)量值較正常對(duì)照值延長(zhǎng) 3s 以上具有臨床意義。以上值僅供參考，由于試劑、人群、儀器等不同，會(huì)導(dǎo)致參考值不同，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考范圍。

ISI 值：＜2.0s。

注意事項(xiàng)：

1、 以上操作，應(yīng)同時(shí)測(cè)定正常對(duì)照。

2、 采血必須使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，貯血必須使用塑料試管或硅化玻璃管，不宜使用普通玻璃容器，避免凝血因子活化。

3、 抽血要順利，抗凝要充分。樣本采集應(yīng)避免溶血及組織污染。

4、 不宜使用肝素、EDTA 或草酸鹽作為抗凝劑。

5、 分離血漿應(yīng)在 2500g 離心 10min 以上，務(wù)必去除血小板。

6、 獲得樣本后應(yīng)及時(shí)檢測(cè)，一般室溫不應(yīng)超過(guò) 1h，4℃不應(yīng)超過(guò) 4h，-20℃可保存2周。

7、 血漿預(yù)溫不宜超過(guò) 5min，PT 凝血活酶溶液預(yù)溫不宜超過(guò) 15min。

8、 應(yīng)精確控制孵育溫度在 37±1℃，過(guò)高或過(guò)低均會(huì)使 PT 延長(zhǎng)。

9、 操作時(shí)光線要充足，凝血酶原時(shí)間的終點(diǎn)計(jì)算以出現(xiàn)混濁的初期凝固為準(zhǔn)。

10、 紅細(xì)胞比容(Hct)不在 20～55%時(shí)，抗凝劑與血液的比例應(yīng)按以下公式調(diào)整：抗凝劑(ml)=(100%-Hct)×血液(ml)×0.00185。

11、 本產(chǎn)品僅用于科研領(lǐng)域，不得用于臨床診斷或其他用途。

12、 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。